醋酸纤维素薄膜电泳分离血浆蛋白,高原之行(6) -爱游戏平台

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?高原的雨滴

?一片云飘过,地上一片阴影

?山腰的云

?清晨,炊烟袅袅

?草原上的马

?高原花

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?高原风光

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?蓝天白云

?青草地

?两头牦牛在斗牛

?像花一样的————牛粪

?据说山上尖尖的地方是天葬台?

?像牵牛花

?天上的光束

?食堂路上的狗

?温泉

?这就是传说中的:一朵鲜花插在牛粪上(纯天然生长形成)

?高原草

核酸电泳技术是生物化学中最为广泛的一种技术,是指使用电流来操纵蛋白质分子以用于一系列生物医学研究、诊断和制造目的实验的过程。目前核酸电泳技术分为以下4种:凝胶电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、等电聚焦电泳、毛细管电泳。

一、 凝胶电泳

凝胶电泳是最常用的一种蛋白表达分析技术。

技术原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同,使其在电泳胶中分离。在大肠杆菌表达纯化外源蛋白的实验中,sds-page更是必不可少的操作。

技术应用是检测蛋白的表达情况(表达量,表达分布),以及分析目的蛋白的纯度等。聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)用于分离蛋白质较小分子核酸。琼脂糖凝胶电泳适用于分离同工酶及其亚型、大分子核酸等。

二、醋酸纤维素薄膜电泳

醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。

技术原理以醋酸纤维薄膜为支持物,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。这种薄膜对蛋白质吸附小,能消除电泳中出现的“托尾”现象,具有分离速度快、样品用量小的特点,适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。

技术应用于血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇激素及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单、快速等优点。

三、等电聚焦电泳

等电聚焦电泳是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展。

技术原理是在稳定的ph梯度中按等电点的不同来分离两性大分子。

技术应用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分,在区带电泳中分辨率最好。常用的ph梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。

四、毛细管电泳

毛细管电泳又称高效毛细管电泳。

技术原理是以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的将液相分离,是一种利用电泳和电渗流的电动力学原理,在一种空芯的微小内径的毛细管中进行混合物的高效分离技术。

毛细管电泳分类为:毛细管自由溶液区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳及胶束毛细管电动力学色谱。

一、什么是电泳

电泳,是电泳现象的简称,指的是带电粒子在直流电场作用下,该粒子向着与自己电性相反的电极方向移动的现象。现代科学利用带电粒子在电场中移动速度的不同而实现不同物质的分离的技术称为电泳技术。如今,电泳技术已广泛应用于现代科学的大多数研究领域,例如化学分析、生物化学研究、药理学、毒剂学、免疫学、微生物学、医学检验、食品化学等,特别是在生物学中常用于细胞、蛋白质、核酸,甚至氨基酸和核苷酸等生物材料的提取和实验研究,在现代实验的样品物质分离和分析中起着重大作用。

二、生物学中的电泳

在生物大分子中(如蛋白质、核酸、多糖等),大多数都是存在带电荷的阳离子/阴离子基团,这些基团常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的h 浓度或其他大分子的相互作用;在人为的直流电场中,这些带电颗粒向电泳仪器的阴极或者阳极移动,移动方向和速度与它们所带电荷类型和大小以及电场方向相关,不同的带电粒子在电场的作用下,移动速度或者不同,逐渐会在电泳载体(一般是凝胶)上分离开来,实现生物分子的分离或提纯,从而便于进一步的实验研究。

电泳的样品支持物(即样品的电泳载体),生物实验大多是凝胶,起到分子筛的作用,一般常用的凝胶有琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶(page)。

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?三、电泳设备

电泳仪器主要是人为地给样品提供直流电场的一组设备,电泳设备最基本的组成是电泳电源、电泳槽以及电极等相关套件。

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四、电泳类型

l 普通电泳根据装置形式大致可以分为水平式电泳、垂直式电泳、转印电泳。其中,水平式电泳使用的介质凝胶一般就是琼脂糖凝胶,这也是实验室里最常用的介质凝胶,而垂直式电泳使用的介质凝胶则是聚丙烯酰胺凝胶;转印电泳中又有湿转电泳和半干转电泳。

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l 其他电泳类型:等电聚焦电泳(ief)、等速电泳、测序电泳、滤纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳等

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